RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit Featured Image

Kitt taċ-Ċellula Pura / Batterja RNAprep

Għall-purifikazzjoni ta 'RNA totali ta' kwalità għolja minn ċelloli u batterji.

Il-Kitt taċ-Ċellula Pura / Batterja RNAprep jipprovdi metodu mgħaġġel, sempliċi u kost-effettiv għall-purifikazzjoni ta 'RNA totali minn ċelloli kkultivati u kampjuni ta' batterji billi tuża kolonna spin effettiva u sistema buffer unika. Il-kit jinkludi RNase-Free Spin Column CR3 għall-purifikazzjoni ta 'RNA ta' kwalità għolja billi tuża teknoloġija tal-membrana tas-silika. RNA totali ta 'kwalità għolja jista' jinkiseb fi 30-40 minuta b'purità għolja u huwa ħieles minn proteina u kontaminazzjoni tad-DNA ġenomika.

Kat. Le	Daqs tal-Ippakkjar
4992235	50 preparazzjoni

Ibgħat email lilna

Dettall tal-Prodott

Eżempju Sperimentali

FAQ

Tags tal-Prodott

Karatteristiċi

■ Buffers u protokolli ottimizzati għal ċelloli kkultivati u kampjuni ta 'batterji jagħmlu l-proċess sempliċi u konvenjenti.
■ DNase I uniku jimminimizza l-kontaminazzjoni tad-DNA ġenomiku.
■ Kolonni CS uniċi ta 'Filtrazzjoni Bla RNase jeliminaw kontaminazzjonijiet oħra.
■ L-RNA ta 'purità għolja u lest għall-użu huwa adattat għal applikazzjonijiet sensittivi downstream.
■ L-ebda estrazzjoni ta 'fenol / kloroform, l-ebda preċipitazzjoni ta' LiCl u etanol, l-ebda ċentrifugazzjoni ta 'gradjent ta' CsCl m'hija meħtieġa, li tagħmel il-proċess sigur u affidabbli.

Applikazzjonijiet

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR f'Ħin Real.
■ Analiżi taċ-ċippa.
■ PolyA Screening, traduzzjoni in vitro, analiżi tal-protezzjoni RNase u klonazzjoni molekulari.

Il-prodotti kollha jistgħu jiġu personalizzati għal ODM / OEM. Għad-dettalji,jekk jogħġbok ikklikkja Servizz Personalizzat (ODM / OEM)

Preċedenti: Reaġent Universali TRNzol

Li jmiss: Kitt tat-Tessuti Puri RNAprep

	Materjal: Ċelloli Jurkat Umani (1 × 10⁶ ) Metodu: L-RNA totali taċ-Ċelloli tal-Jukat Umani ġie iżolat bl-użu tar-RNAprep Pure Cell / Bacteria Kit. Riżultati: Jekk jogħġbok ara l-istampa ta 'l-elettroforeżi tal-ġel ta' l-agarose hawn fuq. 2-4 μl ta '50 μl eluates ġew mgħobbija f'kull karreġġjata. L-elettroforeżi twettqet b'6 V / cm għal 30 min fuq 1% ġel agarose.
	Materjal: TOP10 E.coli (1 × 10⁸) Metodu: L-RNA totali ta 'TOP10 E.coli kien iżolat bl-użu ta' RNAprep Pure Cell / Bacteria Kit. Riżultati: Jekk jogħġbok ara l-istampa ta 'l-elettroforeżi tal-ġel ta' l-agarose hawn fuq. 2-4 μl ta '50 μl eluates ġew mgħobbija f'kull karreġġjata. L-elettroforeżi twettqet b'6 V / cm għal 30 min fuq 1% ġel agarose.

Q: Imblukkar tal-kolonna

A-1 Lisi taċ-ċellula jew omoġenizzazzjoni mhux biżżejjed

---- Naqqas l-użu tal-kampjun, żid l-ammont ta 'lysis buffer, żid l-omoġenizzazzjoni u l-ħin tal-lysis.

A-2 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Naqqas l-ammont ta 'kampjun użat jew żid l-ammont ta' lysis buffer.

Q: Rendiment baxx ta 'RNA

A-1 Lisi insuffiċjenti taċ-ċelloli jew omoġenizzazzjoni

---- Naqqas l-użu tal-kampjun, żid l-ammont ta 'lysis buffer, żid l-omoġenizzazzjoni u l-ħin tal-lysis.

A-2 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Jekk jogħġbok irreferi għall-kapaċità massima tal-ipproċessar.

A-3 RNA mhix elwita kompletament mill-kolonna

---- Wara li żżid ilma mingħajr RNase, ħallih għal ftit minuti qabel iċ-ċentrifugazzjoni.

A-4 Etanol fl-elwent

---- Wara t-tlaħliħ, erġa 'ċċentrifuga u neħħi kemm jista' jkun il-buffer tal-ħasil.

A-5 Il-mezz ta 'kultura taċ-ċelloli ma jitneħħiex kompletament

---- Meta tiġbor iċ-ċelloli, jekk jogħġbok kun żgur li tneħħi l-medium tal-kultura kemm jista 'jkun.

A-6 Iċ-ċelloli maħżuna fir-RNAstore mhumiex effettivament ċentrifugati

---- Id-densità tar-RNAstore hija akbar mill-medja tal-kultura taċ-ċelloli medja; għalhekk il-forza ċentrifugali għandha tiżdied. Huwa ssuġġerit li ċċentrifuga bi 3000x g.

A-7 Kontenut baxx ta 'RNA u abbundanza fil-kampjun

---- Uża kampjun pożittiv biex tiddetermina jekk ir-rendiment baxx huwiex ikkawżat mill-kampjun.

Q: Degradazzjoni tal-RNA

A-1 Il-materjal mhux frisk

---- It-tessuti friski għandhom jinħażnu f'nitroġenu likwidu immedjatament jew immedjatament imqiegħed fir-reaġent RNAstore biex jiġi żgurat l-effett ta 'estrazzjoni.

A-2 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Naqqas l-ammont tal-kampjun.

A-3 RNase contamination

---- Għalkemm il-buffer ipprovdut fil-kitt ma fihx RNase, huwa faċli li tikkontamina RNase waqt il-proċess ta 'estrazzjoni u għandu jiġi mmaniġġjat b'attenzjoni.

A-4 Tniġġis bl-elettroforeżi

---- Ibdel il-buffer tal-elettroforeżi u kun żgur li l-konsumabbli u l-Buffer tat-Tagħbija huma ħielsa minn kontaminazzjoni RNase.

A-5 Tagħbija żejda għall-elettroforeżi

---- Naqqas l-ammont ta 'tagħbija tal-kampjun, it-tagħbija ta' kull bir m'għandhiex taqbeż 2 μg.

M: Kontaminazzjoni tad-DNA

A-1 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Naqqas l-ammont tal-kampjun.

A-2 Xi kampjuni għandhom kontenut għoli ta 'DNA u jistgħu jiġu ttrattati b'DNase.

---- Wettaq trattament ta 'DNase Ħieles mill-RNase għas-soluzzjoni ta' RNA miksuba, u l-RNA jista 'jintuża direttament għal esperimenti sussegwenti wara t-trattament, jew jista' jiġi purifikat aktar minn kitts ta 'purifikazzjoni ta' RNA.

M: Kif tneħħi RNase minn konsumabbli sperimentali u oġġetti tal-ħġieġ?

Għal oġġetti tal-ħġieġ, moħmija f'150 ° C għal 4 sigħat. Għal kontenituri tal-plastik, mgħaddsa f'0.5 M NaOH għal 10 min, imbagħad laħlaħ sewwa b'ilma ħieles minn RNase u mbagħad sterilizza biex tneħħi kompletament RNase. Ir-reaġenti jew is-soluzzjonijiet użati fl-esperiment, speċjalment l-ilma, għandhom ikunu ħielsa minn RNase. Uża ilma ħieles mill-RNase għall-preparazzjonijiet kollha tar-reaġent (żid ilma ma 'flixkun tal-ħġieġ nadif, żid DEPC għal konċentrazzjoni finali ta' 0.1% (V / V), ħawwad matul il-lejl u awtoklavi).

Ikteb il-messaġġ tiegħek hawn u ibagħtilna