Kitt tat-Tessuti Puri RNAprep

Għal purifikazzjoni ta 'RNA totali sa 100 μg minn tessuti ta' annimali.

Il-Kitt tat-Tessuti Puri RNAprep jipprovdi metodu mgħaġġel, sempliċi u kost-effettiv għall-purifikazzjoni ta 'RNA totali minn tessuti tal-annimali billi tuża kolonna spin effettiva u sistema buffer unika. Il-kit jinkludi kolonni spin CR3 Ħieles mill-RNase għall-purifikazzjoni ta 'RNA ta' kwalità għolja billi tuża teknoloġija tal-membrana tas-silika. RNA totali ta 'kwalità għolja jista' jinkiseb f'40-50 minuta b'purità għolja u huwa ħieles minn kontaminazzjoni ta 'proteina u DNA ġenomika.

Kat. Le	Daqs tal-Ippakkjar
4992236	50 preparazzjoni

Ibgħat email lilna

Dettall tal-Prodott

Eżempju Sperimentali

FAQ

Tags tal-Prodott

Karatteristiċi

■ Buffers ottimizzati għat-tessuti tal-annimali jagħmlu l-proċess sempliċi u konvenjenti.
■ DNase I uniku jimminimizza l-kontaminazzjoni tad-DNA ġenomiku.
■ L-RNA ta 'purità ogħla u lest għall-użu huwa adattat għal applikazzjonijiet sensittivi downstream.
■ M'hemmx bżonn ta 'estrazzjoni ta' fenol / kloroform, l-ebda preċipitazzjoni ta 'LiCl u etanol, u l-ebda ċentrifugazzjoni ta' gradjenti CsCl, li tagħmel il-proċess sigur u affidabbli.

Applikazzjonijiet

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR f'Ħin Real.
■ Analiżi taċ-ċippa.
■ PolyA Screening, traduzzjoni in vitro, analiżi tal-protezzjoni RNase u klonazzjoni molekulari.

Il-prodotti kollha jistgħu jiġu personalizzati għal ODM / OEM. Għad-dettalji,jekk jogħġbok ikklikkja Servizz Personalizzat (ODM / OEM)

Preċedenti: Kitt taċ-Ċellula Pura / Batterja RNAprep

Li jmiss: RNAprep Pure FFPE Kit

Materjal: 20 mg embrijun (13-il jum), 15 mg kliewi, 10 mg fwied, 15 mg milsa, 10 mg timu, 20 mg pulmun
Metodu: RNA totali minn kampjuni ta 'tessuti differenti ta' far ġie ppurifikat bl-użu tal-Kitt tat-Tessuti Puri RNAprep.
Riżultati: L-istampa tal-elettroforeżi tal-ġel agarose hija murija hawn fuq. 2-4 μl ta '100 μl eluates ġew mgħobbija kull karreġġjata.
M: TIANGEN DNA Marker III;
Sqaq 1-2: Embrijun (13-il jum); Sqaq 3: Kliewi; Sqaq 4-6: Fwied; Sqaq 7: Milsa; Sqaq 8: Thymus; Sqaq 9: Pulmun.
L-elettroforeżi saret b'6 V / cm għal 30 min fuq 1% ġel ta 'agarose ..

Q: Imblukkar tal-kolonna

A-1 Lisi taċ-ċellula jew omoġenizzazzjoni mhux biżżejjed

---- Naqqas l-użu tal-kampjun, żid l-ammont ta 'lysis buffer, żid l-omoġenizzazzjoni u l-ħin tal-lysis.

A-2 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Naqqas l-ammont ta 'kampjun użat jew żid l-ammont ta' lysis buffer.

Q: Rendiment baxx ta 'RNA

A-1 Lisi insuffiċjenti taċ-ċelloli jew omoġenizzazzjoni

---- Naqqas l-użu tal-kampjun, żid l-ammont ta 'lysis buffer, żid l-omoġenizzazzjoni u l-ħin tal-lysis.

A-2 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Jekk jogħġbok irreferi għall-kapaċità massima tal-ipproċessar.

A-3 RNA mhix elwita kompletament mill-kolonna

---- Wara li żżid ilma mingħajr RNase, ħallih għal ftit minuti qabel iċ-ċentrifugazzjoni.

A-4 Etanol fl-elwent

---- Wara t-tlaħliħ, erġa 'ċċentrifuga u neħħi kemm jista' jkun il-buffer tal-ħasil.

A-5 Il-mezz ta 'kultura taċ-ċelloli ma jitneħħiex kompletament

---- Meta tiġbor iċ-ċelloli, jekk jogħġbok kun żgur li tneħħi l-medium tal-kultura kemm jista 'jkun.

A-6 Iċ-ċelloli maħżuna fir-RNAstore mhumiex effettivament ċentrifugati

---- Id-densità tar-RNAstore hija akbar mill-medja tal-kultura taċ-ċelloli medja; għalhekk il-forza ċentrifugali għandha tiżdied. Huwa ssuġġerit li ċċentrifuga bi 3000x g.

A-7 Kontenut baxx ta 'RNA u abbundanza fil-kampjun

---- Uża kampjun pożittiv biex tiddetermina jekk ir-rendiment baxx huwiex ikkawżat mill-kampjun.

Q: Degradazzjoni tal-RNA

A-1 Il-materjal mhux frisk

---- It-tessuti friski għandhom jinħażnu f'nitroġenu likwidu immedjatament jew immedjatament imqiegħed fir-reaġent RNAstore biex jiġi żgurat l-effett ta 'estrazzjoni.

A-2 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Naqqas l-ammont tal-kampjun.

A-3 RNase contamination

---- Għalkemm il-buffer ipprovdut fil-kitt ma fihx RNase, huwa faċli li tikkontamina RNase waqt il-proċess ta 'estrazzjoni u għandu jiġi mmaniġġjat b'attenzjoni.

A-4 Tniġġis bl-elettroforeżi

---- Ibdel il-buffer tal-elettroforeżi u kun żgur li l-konsumabbli u l-Buffer tat-Tagħbija huma ħielsa minn kontaminazzjoni RNase.

A-5 Tagħbija żejda għall-elettroforeżi

---- Naqqas l-ammont ta 'tagħbija tal-kampjun, it-tagħbija ta' kull bir m'għandhiex taqbeż 2 μg.

M: Kontaminazzjoni tad-DNA

A-1 L-ammont tal-kampjun huwa kbir wisq

---- Naqqas l-ammont tal-kampjun.

A-2 Xi kampjuni għandhom kontenut għoli ta 'DNA u jistgħu jiġu ttrattati b'DNase.

---- Wettaq trattament ta 'DNase Ħieles mill-RNase għas-soluzzjoni ta' RNA miksuba, u l-RNA jista 'jintuża direttament għal esperimenti sussegwenti wara t-trattament, jew jista' jiġi purifikat aktar minn kitts ta 'purifikazzjoni ta' RNA.

M: Kif tneħħi RNase minn konsumabbli sperimentali u oġġetti tal-ħġieġ?

Għal oġġetti tal-ħġieġ, moħmija f'150 ° C għal 4 sigħat. Għal kontenituri tal-plastik, mgħaddsa f'0.5 M NaOH għal 10 min, imbagħad laħlaħ sewwa b'ilma ħieles minn RNase u mbagħad sterilizza biex tneħħi kompletament RNase. Ir-reaġenti jew is-soluzzjonijiet użati fl-esperiment, speċjalment l-ilma, għandhom ikunu ħielsa minn RNase. Uża ilma ħieles mill-RNase għall-preparazzjonijiet kollha tar-reaġent (żid ilma ma 'flixkun tal-ħġieġ nadif, żid DEPC għal konċentrazzjoni finali ta' 0.1% (V / V), ħawwad matul il-lejl u awtoklavi).

Ikteb il-messaġġ tiegħek hawn u ibagħtilna